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12-31
1,什么是瞬時轉染和穩(wěn)定轉染?瞬時轉染:外源片段的表達時間短暫。這主要是因為外源導入的裸露的載體整合入基因組的幾率非常低,所以以染色體外(episomal)形式存在,不能隨細胞分裂而一同復制導致最后拷貝數(shù)被稀釋導致的。而且考慮到細胞分裂會稀釋質粒的量,所以起初轉染的質粒拷貝數(shù)*。這就導致瞬時轉染呈現(xiàn)一個高拷貝到低拷貝迅速降低的過程,且無法在這個系統(tǒng)上實現(xiàn)可誘導表達。穩(wěn)定轉染:是相對瞬時轉染而言,進入細胞的質粒整合入細胞基因組中,并能隨細胞分裂穩(wěn)定傳遞下去。在這個系統(tǒng)中,質粒表...
12-24
肝纖維化動物模型化學性損傷法:雄性Wistar大鼠,體重130g左右,用硫代乙酰胺腹腔內注射,第1次20mg/100g體重,從第二次起12mg/100g體重,每周注射2次,共8周。評價:第3周,在肝小葉間中間帶出現(xiàn)大片的肝細胞變性壞死和炎細胞浸潤,炎細胞浸潤、壞死細胞數(shù)和程度超過豬血清模型。6周后出現(xiàn)增生纖維束,纖維增生晚于和少于豬血清模型。大鼠肝纖維組織中有I型膠原的mRNA增多。肝纖維化動物模型四氯化碳法:180~200gWistar或SD大鼠,皮下注射40%-50%CC...
12-24
.將水迷宮加入適當?shù)乃?,水溫控制?5±1℃。2.實驗前把動物帶入實驗室中熟悉環(huán)境。3.設置軟件。4.第一階段:(定位航行)將小鼠頭對著墻壁依次放入四個象限水迷宮進行實驗(所有大鼠需全部做完后換下一象限)。若動物在60s內登上平臺區(qū)域,則錄像結束。若動物在60s內未登上平臺區(qū)域,則用木棍指引大鼠游上平臺,并停留30s。每只小鼠每天訓練4次,訓練天數(shù)為5天。5.每只動物實驗結束后需用干毛巾擦拭,必要時需要使用電吹風吹干。6.第二階段(空間探索):待第一到第四象限全...
12-17
科研實驗優(yōu)勢:1.獨立實驗室和動物中心:實驗室面積600多平方米,動物中心1000平方米,公司目前具備較好的的生物學、醫(yī)學技術服務平臺,能夠為廣大客戶提供醫(yī)學科研樣本檢測、合作研究、開發(fā)及生產服務;2.專業(yè)的技術人員:技術團隊包括研究員(博士后)2人,助理研究員(博士)4人,核心研究員(碩士)15人;科研實驗介紹:1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq3.蛋白質組學:...
12-17
大鼠腦缺血再灌注損傷模型模型:麻醉大鼠,然后在頸部中線切開一個切口,暴露頸外動脈和頸內動脈,用無菌縫合線結扎,血管夾夾住頸內動脈。隨后在頸總動脈上切口,然后插入線栓。2h后,大鼠進行再灌注。模型大鼠成功構建的標準:大鼠出現(xiàn)癥狀如偏癱,對側前肢下垂和站立不穩(wěn)。Bederson評分在1-3分,48小時內沒有死亡,就認為模型成功。文獻上用的是2-3分的模型。優(yōu)點:無需開顱,創(chuàng)傷較??;缺血部位相對固定,可控性好;可實現(xiàn)腦缺血后再灌注,是理想的標準局灶性腦缺血動物模型。動物選擇:目前多...
12-3
染色原理:所謂三色染色通常是指染胞核和能選擇性的顯示膠原纖維和肌纖維。該法染色原理不陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關:分子的大小由分子量來體現(xiàn),小分子量易穿透結構致密、滲透性低的組織;而大分子量則只能進入結構疏松的、滲透性高的組織。然而,淡綠或苯胺藍的分子量都很大,因此Masson染色后肌纖維呈紅色,膠原纖維呈綠色(淡綠)或藍色(苯胺藍),主要用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維。Masson染色特點:1、染色穩(wěn)定2、分化時間短,1~2s3、色彩清晰鮮艷4、適用范圍廣,適宜于組織的石...
12-3
進行分子實驗檢測時需要先準備PCR反應混合物:根據DNA樣本的數(shù)量來確定除了DNA外其他混合物的體積(額外增加一份來確保有足夠的PCR反應混合物),將擴增每一個遺傳標記并且在每一個PCR反應管內分19.5uL的反應混合物。配制膠溶液:將25g尿素、7.5mL40%丙烯酰胺:PDA(19:1)加入到250mL的錐形瓶中。加蒸餾水至50mL,充分混勻來溶解尿素(見注釋4)。準備制膠板:把膠板洗干凈,確保上面沒有灰塵,用硅化玻璃板。根據各個廠家的不同把玻璃板夾在一起并且用膠條封住底...