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1，什么是瞬時轉染和穩(wěn)定轉染？瞬時轉染：外源片段的表達時間短暫。這主要是因為外源導入的裸露的載體整合入基因組的幾率非常低，所以以染色體外(episomal)形式存在，不能隨細胞分裂而一同復制導致最后拷貝數(shù)被稀釋導致的。而且考慮到細胞分裂會稀釋質粒的量，所以起初轉染的質粒拷貝數(shù)*。這就導致瞬時轉染呈現(xiàn)一個高拷貝到低拷貝迅速降低的過程，且無法在這個系統(tǒng)上實現(xiàn)可誘導表達。穩(wěn)定轉染：是相對瞬時轉染而言，進入細胞的質粒整合入細胞基因組中，并能隨細胞分裂穩(wěn)定傳遞下去。在這個系統(tǒng)中，質粒表...

肝纖維化動物模型化學性損傷法：雄性Wistar大鼠，體重130g左右，用硫代乙酰胺腹腔內注射，第1次20mg/100g體重，從第二次起12mg/100g體重，每周注射2次，共8周。評價:第3周，在肝小葉間中間帶出現(xiàn)大片的肝細胞變性壞死和炎細胞浸潤，炎細胞浸潤、壞死細胞數(shù)和程度超過豬血清模型。6周后出現(xiàn)增生纖維束，纖維增生晚于和少于豬血清模型。大鼠肝纖維組織中有I型膠原的mRNA增多。肝纖維化動物模型四氯化碳法：180～200gWistar或SD大鼠，皮下注射40%-50%CC...

.將水迷宮加入適當?shù)乃?，水溫控制?5±1℃。2.實驗前把動物帶入實驗室中熟悉環(huán)境。3.設置軟件。4.第一階段：（定位航行）將小鼠頭對著墻壁依次放入四個象限水迷宮進行實驗（所有大鼠需全部做完后換下一象限）。若動物在60s內登上平臺區(qū)域，則錄像結束。若動物在60s內未登上平臺區(qū)域，則用木棍指引大鼠游上平臺，并停留30s。每只小鼠每天訓練4次，訓練天數(shù)為5天。5.每只動物實驗結束后需用干毛巾擦拭，必要時需要使用電吹風吹干。6.第二階段（空間探索）：待第一到第四象限全...

科研實驗優(yōu)勢：1.獨立實驗室和動物中心：實驗室面積600多平方米，動物中心1000平方米，公司目前具備較好的的生物學、醫(yī)學技術服務平臺，能夠為廣大客戶提供醫(yī)學科研樣本檢測、合作研究、開發(fā)及生產服務；2.專業(yè)的技術人員：技術團隊包括研究員（博士后）2人，助理研究員（博士）4人，核心研究員（碩士）15人；科研實驗介紹：1.基因組學：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析2.轉錄組學：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq3.蛋白質組學：...

大鼠腦缺血再灌注損傷模型模型：麻醉大鼠，然后在頸部中線切開一個切口，暴露頸外動脈和頸內動脈，用無菌縫合線結扎，血管夾夾住頸內動脈。隨后在頸總動脈上切口，然后插入線栓。2h后，大鼠進行再灌注。模型大鼠成功構建的標準：大鼠出現(xiàn)癥狀如偏癱，對側前肢下垂和站立不穩(wěn)。Bederson評分在1-3分，48小時內沒有死亡，就認為模型成功。文獻上用的是2-3分的模型。優(yōu)點：無需開顱，創(chuàng)傷較??；缺血部位相對固定，可控性好；可實現(xiàn)腦缺血后再灌注，是理想的標準局灶性腦缺血動物模型。動物選擇：目前多...

染色原理：所謂三色染色通常是指染胞核和能選擇性的顯示膠原纖維和肌纖維。該法染色原理不陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關：分子的大小由分子量來體現(xiàn)，小分子量易穿透結構致密、滲透性低的組織；而大分子量則只能進入結構疏松的、滲透性高的組織。然而，淡綠或苯胺藍的分子量都很大，因此Masson染色后肌纖維呈紅色，膠原纖維呈綠色(淡綠)或藍色(苯胺藍)，主要用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維。Masson染色特點：1、染色穩(wěn)定2、分化時間短，1～2s3、色彩清晰鮮艷4、適用范圍廣，適宜于組織的石...

進行分子實驗檢測時需要先準備PCR反應混合物：根據DNA樣本的數(shù)量來確定除了DNA外其他混合物的體積（額外增加一份來確保有足夠的PCR反應混合物），將擴增每一個遺傳標記并且在每一個PCR反應管內分19.5uL的反應混合物。配制膠溶液：將25g尿素、7.5mL40%丙烯酰胺：PDA(19:1)加入到250mL的錐形瓶中。加蒸餾水至50mL，充分混勻來溶解尿素(見注釋4)。準備制膠板：把膠板洗干凈，確保上面沒有灰塵，用硅化玻璃板。根據各個廠家的不同把玻璃板夾在一起并且用膠條封住底...